服務熱線
021-54479081
021-54461587
細胞株是用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質(zhì)或標志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。國內(nèi)*的細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標志的培養(yǎng)細胞。
下面上海研域生物技術員就為您分享細胞株培養(yǎng)技術的幾大要點,趕緊拿起小本本記好了!
一、取材
細胞株培養(yǎng)的材料主要來源于外科手術或活檢瘤組織,取材時避免用壞死組織,要挑選瘤細胞集中和活力較好的部位,瘤性轉移淋巴結或胸腹水是較好的培養(yǎng)材料。取材后盡快培養(yǎng),因故不能立即培養(yǎng)者,可凍存。細胞株的培養(yǎng)方法及凍存方法同前述正常組織。
二、成纖維細胞排除
在細胞株培養(yǎng)中常混雜有一些成纖維細胞,培養(yǎng)時能與瘤細胞同時生長,并常壓過癌細胞,導致癌細胞生長受阻以至消失,應仔細排除。排除方法常有:機械刮除法、反復貼壁法、消化排除法、膠原酶消化法等。
三、提高細胞培養(yǎng)存活率和生長率
根據(jù)實驗經(jīng)驗,細胞株要經(jīng)過對新環(huán)境的適應才能生長,因此不能局限于一般培養(yǎng)法,須采用一些特殊措施。如:用適宜底物,鼠尾膠原底層及飼細胞底層等。用細胞生長因子,根據(jù)細胞種類不同選用不同的促細胞生長因子,如胰島素,雌激素等。也可以考慮動物媒介培養(yǎng)。
總之,在細胞株待轉化細胞數(shù)量明顯上升,并出現(xiàn)細胞團塊后,可轉入細胞培養(yǎng)瓶中,加培養(yǎng)基,常溫培養(yǎng)半個月,一般每隔一周觀察一次,決定是否換液、傳代,靠譜的細胞株的每個步驟都至關重要。細胞生長達一定數(shù)量后凍存,凍存前應進行核型分析和存檔。
另外,上海研域生物專注科研試劑盒的研發(fā)及銷售多年,涉及分子生物學、細胞生物學、免疫學等生命科學的各個領域,滿足您實驗所需,以實現(xiàn)與客戶的雙贏,完善的庫存及供應體系以及穩(wěn)定的專業(yè)技術,保證產(chǎn)品均能現(xiàn)貨供應。歡迎您前來咨詢與選購。