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酶聯(lián)免疫診斷技能的開(kāi)展:
酶聯(lián)免疫吸附診斷技能是以酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)為基礎(chǔ)的測(cè)定技能。因?yàn)榭贵w能夠高度特異與抗原分子結(jié)合,因此通過(guò)抗原-抗體的特異性識(shí)別反響來(lái)進(jìn)行檢測(cè)就能夠成為一種簡(jiǎn)潔的檢測(cè)程序。
酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn),創(chuàng)始于1971年,當(dāng)時(shí),瑞典學(xué)者Engvail和Perlmannn,荷蘭學(xué)者Van Weerman和Schuurs別離報(bào)道將免疫技能開(kāi)展為檢測(cè)體液中微量物質(zhì)的固相免疫測(cè)定辦法,稱(chēng)為酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)。ELISA是免疫測(cè)定技能中應(yīng)用廣,有開(kāi)展前途的一種技能,可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。
初開(kāi)展的免疫酶測(cè)定辦法,是使酶與抗體或抗原結(jié)合,用以檢查組織中相應(yīng)的抗原或抗體的存在。后來(lái)開(kāi)展為將抗原或抗體吸附于固相載體,在載體上進(jìn)行免疫酶染色,底物顯色后用肉眼或分光光度計(jì)判定結(jié)果。
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酶聯(lián)免疫測(cè)定辦法及原理:
酶免疫測(cè)定辦法的基本原理是先將已知的抗體或抗原結(jié)合在某種固形載體上,并堅(jiān)持其免疫活性。測(cè)定時(shí),將待檢標(biāo)本和酶標(biāo)抗原或抗體按不同過(guò)程與固相載體表面吸附的抗原或抗體發(fā)生反響。用洗滌的辦法分離抗原抗體復(fù)合物和游離成分。然后參加底物顯色,依據(jù)顏色深淺進(jìn)行定性或定量測(cè)定。